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15003865887 15038257928凝胶过滤层析中和凝胶电泳中的分子筛效应有什么不同
作者：
Admin 浏览：
发布时间：
2021-07-30
凝胶过滤层析中和凝胶电泳中的分子筛效应有什么不同
凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析。是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质，多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质，小分子物质能进入其内部，流下时路程较长，而大分子物质却被排除在外部，下来的路程短，当一混合溶液通过凝胶过滤层析柱时，溶液中的物质就按不同分子量筛分开了。
而在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中，蛋白质的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。进入分离胶后，由于聚丙烯酰胺的分子筛作用，小分子的蛋白质可以容易的通过凝胶孔径，阻力小，迁移速度快；大分子蛋白质则受到较大的阻力而被滞后，这样蛋白质在电泳过程中就会根据其各自分子量的大小而被分离。整块胶板相当于一个分子筛。
分子筛的第一个作用是晶体的外表面吸附多种吸附物。对于分子筛的研究表明，其外表面提供了一个精确的被吸附的分子尺寸。如果被吸附物的分子超过该尺寸，就不能进入晶体内部，只能被吸附在外表面。表面吸附作用(也发生在非结晶体的表面，如硅胶)，这是很弱的，而在晶体内部有成千上万的晶体空隙和槽，进一步吸附分子。分子筛由硅、铝和氧原子组成。这些分子的离子电荷在稳定的晶体中加起来的总和应是零。为平衡正负负荷，加入钾、钠、钙等正电荷离子。带有正负离子的巨大的面被称做吸附场。
在吸附物与被吸附物之间有很强的吸引力，需要很大能量的(一般是热能)才能消除吸引力，还原成筛子。随着被吸附物的浓度增加，密度电荷场增强以至于几乎没有几层被吸附分子存在。最终，被吸附物接近满负荷，孔被填满，类似于毛细管冷凝。如果水和苯(比如)分子都进入13X晶体，都有同样的机会找到电荷场，吸附到晶体中，因为两个分子都具有极性。
可是，有些分子像氮气、氩气因为没有明显的极性，他们可能很弱地吸附在晶体上，当大量的极性分子涌入时被轻易地替换掉。在分子筛的吸附过程中，热能源释放到周围。
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